VIROLOGIAMAIGODDDD

Igor Pacheco

1oLgA

06/06/24-

Miau, que no final o sorriso apareça

Os vírus:

O genoma viral em RNA(+) é por si só infeccioso.

Os genomas de vírus em DNA são os de maiores dimensões.

O genoma viral em RNA(-) não é infeccioso por si só.

Os genomas de vírus em RNA são os de maiores dimensões.

As vias que permitem um vírus sair do endossoma tardio e ter acesso ao citoplasma da célula hospedeira são as seguintes: (escolha a opção correta)

Fusão, montagem e permeabilização

Budding, lise e formação de poro

Lise, permeabilização e fusão

Permeabilização, lise e budding

A saída de um vírus da célula hospedeira pode ocorrer por vários processos. Leia as frases e escolha as opções corretas.

Vírus não envelopados podem sair da célula por budding

Vírus não envelopados provocam a lise celular

Vírus envelopados podem sair da célula por formação de vesículas de exocitose

Vírus envelopados provocam sempre a lise celular

Leia as seguintes frases e escolha a frase correta

Os vírus com genoma ssRNA(+) apresentam genomas segmentados

Vírus em RNA apresentam mutações pontuais por erros de replicação em número superior aos que são observados para vírus dsDNA.

Os vírus em RNA apresentam genomas de grandes dimensões

Vírus com genoma ssDNA são na sua maioria genomas ambisense

Leia as seguintes frases e escolha a frase correta:

O genoma de um vírus icosaédrico é sempre encapsidado numa cápside pré-formada (procapside).

A encapsidação do genoma viral ligada ao gasto de ATP ocorre para vírus com cápsides icosaédricas

A montagem da cápside, nos vírus com cápside helicoidal, ocorre antes da formação do RNA viral na célula.

A encapsidação do genoma viral ligada ao gasto de ATP ocorre para vírus com cápsides helicoidal

Sobre os genoma virais em RNA e DNA: (escolha a opção correta)

Apenas os genomas em DNA apresentam cadeia duplas circulares

Apenas os genomas em RNA apresentam cadeias simples circulares

Apenas os genomas em DNA apresentam cadeia dupla

Apenas os genomas em RNA apresentam cadeias simples lineares

Sobre a classificação de Baltimore: (escolha a opção correta)

A classe III de Baltimore agrupa vírus com genoma dsRNA

A classe IV de Baltimore agrupa vírus com genoma dsDNA

A classe I de Baltimore agrupa vírus com genoma ssDNA

A classe II de Baltimore agrupa vírus com genoma ssRNA

A sequência do genoma de uma população de vírus de RNA agrupa-se em torno de uma sequência “master”, mas cada genoma é diferente. Um genoma raro com uma mutação específica pode sobreviver a um evento de seleção e a mutação será encontrada em todos os genomas que descendem desse. Esta descrição corresponde a:

Template switching

Bottleneck

Quasispecies

Mutational coupling

Sobre a variabilidade genética dos genomas virais, escolha a opção correta

Os vírus em RNA apresentam menor variabilidade genética.

Os vírus, por serem pequenos, são conhecidos em profundidade e sabe-se a função de cada gene.

A maior variabilidade genética de um vírus tem na origem a atividade da enzima RNA polimerase.

A maior variabilidade genética de um vírus tem na origem a atividade da enzima DNA polimerase.

Os vírus SV40, HPV e adenovírus (não envelopados) entram na célula pelos seguintes mecanismos:

Fusão com a membrana plasmática e orientação da partícula viral até à membrana nuclear, sendo o genoma entregue no núcleo.

Endocitose mediada por recetores, sendo o genoma posteriormente libertado no citoplasma.

Formação de poro na membrana plasmática, ficando os genomas retidos no citoplasma onde decorre a replicação viral.

Endocitose mediada por recetores e orientação da cápside viral até à membrana nuclear, sendo o genoma entregue no núcleo.

As glicoproteínas que se apresentam no envelope viral do HSV são adquiridas da seguinte forma:

Quando a cápside viral sofre budding na membrana interna nuclear.

Quando a cápside viral sofre budding na membrana plasmática

Quando a cápside viral é envolta por vesículas de Golgi.

Nenhuma das frases anteriores está correta

Qual dos seguintes vírus codifica para uma DNA polimerase?

HPV

Adenovirus

HSV

SV40

Efeitos de infeções virais conhecidas desde:

Antiguidade Clássica

Idade Moderna

Renascimento

Idade Média

Espécies virais conhecidas:

Pequeno número, atendendo à ubiquidade dos vírus

Número maior ao das espécies de plantas

Outra

Estão na sua maioria incluídas em géneros, famílias e ordens

Um vírus cuja cápside seja de arquitetura icosaédrica:

Apresenta geralmente envelope

Tem maior possibilidade de encapsidar variantes de genoma de tamanho maior do que um vírus de cápside helicoidal

Tem mais possibilidade de formar cápsides vazias do que um vírus de cápside helicoidal

É fortemente estabilizado pela presença de genoma no seu interior

O conceito de vírus:

Foi estabelecido com o estudo de bacteriófagos

Foi estabelecido ao ser estudada a causa da poliomielite

É um resultado dos trabalhos de Pasteur sobre a raiva

Foi estabelecido ao estudar-se a causa da doença do mosaico do tabaco

De entre os vírus de RNA que infetam mamíferos:

Um pequeno número de espécies contém RNA e DNA como suporte de informação genética.

Existem muitas famílias cujo primeiro passo de expressão de informação genética é a transcrição

Pequenos números de famílias têm envelope.

Famílias que recorrem à transcrição reversa

Interferão:

É produzido rapidamente após a infeção, e em quantidade muito elevadas

Tem por efeito inibir a expressão especifica de mRNA em células vizinhas de células infetadas

Tem por efeito inibir a expressão generalizada de mRNA em células vizinhas de células infetadas

Induzido mais eficientemente por vírus de DNA

O tamanho dos genomas virais de RNA é aproximadamente de:

Algumas centenas de aminoácidos

Uma dezena de milhar de bases

Várias dezenas de milhares de bases

Aproximadamente 10000 aa

As ligações entre as unidades que compõem a cápside viral:

São catalisadas por enzimas de hospedeiros

Fortes e irreversíveis

São ligações reversíveis cuja estrutura depende fortemente das condições do meio

Podem ser internas para armazenar energia química

Os vírus cuja porta de entrada é o epitélio intestinal:

Não têm envelope

Arbovirus

DNA

Têm envelope

As proteínas não estruturais estão codificadas:

Obrigatoriamente na extremidade 3’ do genoma na superfície – picorna vírus-like

Nenhuma

Nos genes dos hospedeiros nos vírus de DNA

Obrigatoriamente na extremidade 5’ do genoma na superfície – sindbis vírus-like

Os seguintes tipos de agrupamento existem na fase viral:

Espécie, família e ordem

Espécie, subfamília e classe

Género, família e ordem

Espécie, género e classe

A lise::

Não impede a entrada de partículas por endocitose

Se ocorrer em infeção por vírus com envelope é num estádio tardio

É frequentemente no início da infeção produtiva do vírus com envelope

É rara em infeções por vírus sem envelope

. Os vírus de animais de genoma segmentado:

São frequentes entres os vírus cujo genoma é de DNA

São os que têm menos genoma

Apresentam geralmente os segmentos repartidos por várias partículas virais

Apresentam todos os fragmentos na mesma partícula viral

Quais as principais diferenças entre um organismo viral e uma célula eucariótica:

Os vírus multiplicam-se por divisão de um antecessor, num processo semelhante à meiose

Alguns vírus sofrem processos de MPT

Os vírus não codificam os componentes necessários ao metabolismo energético

Os vírus são resultado de um processo de montagem dos seus componentes, que termina antes do final da fase de eclipse

As partículas virais têm dimensões de ordem:

Um décimo do tamanho das células hospedeiras

Dezenas e centenas de micrómetros

Dezenas e centenas de angströns

Dezenas e centenas de nanometros

Classificação de Baltimore:

Pode vir a englobar os viroides se se considerar uma classe adicional de RNA

Existem 3 classes de vírus de RNA e 4 vírus de DNA

Abrange todos os vírus conhecidos

É importante o critério de distinção entre géneros da mesma família

Na replicação do genoma de um vírus de RNA de tamanho típico:

Cada genoma replicado apresentar aproximadamente 20 erros

Cada genoma replicado apresenta aproximadamente 1 erro

Há menos probabilidade de erros quando se usa uma DNA polimerase

Os ribossomas podem ultrapassar codões STOP para não originar erros

Contagium Vivum Fluidum, significa:

Partículas constituídas por proteínas e ácidos nucleicos capazes de se multiplicar apenas em tecidos vivos.

Organismo com dimensões sub-microscópicas, capaz de se multiplicar em tecido vivo.

Organismo com dimensões de vários mícron, capaz de se multiplicar em bactérias.

Bacteriófago infeta a planta do tabaco.

Objetivo terapia de sy:

Combate de micoses

Combate de Poliomielite

Combate infeções virais latentes

Combate infeções bacterianas

Considera-se organismo como vírus:

Formação a partir da divisão de uma partícula pré-existente

Constituído por moléculas autorreplicante RNA

Genoma DNA< 2 Mbp

Formação a partir de montagem de constituintes pré-formados

Hemaglutinação

Aglutinação de eritrócito á superfície de células

Aglutinação de eritrócitos à superfície de partículas virais que se quer quantificar.

Interação partícula viral com co-recetores de linfócitos B

Interação antigénio-anticorpo (ELISA)

Métodos diagnóstico viral (deteção de ácidos nucleicos)

Baseiam-se em amplificação isotérmica

Baseiam-se na pesquisa de anticorpos contra vírus

Empregam sondas Taqman

Baseiam-se em PCR

Viroíde difere de RNA satélite porque:

RNA satélite codifica proteínas da cápside

Viroíde é encapsidado e RNAs não.

Virioide tem aproximadamente 300 bases e RNA aproximadamente 1000

Viroíde não codifica proteínas com RNA de cadeia simples.

Vírus RNA sem Transcriptase reversa:

Têm pouco processo de montagem no núcleo

Quase todos têm processo de montagem no citoplasma

Quase todos replicam no citoplasma

Replicam genoma no citoplasma

Replicação genoma 10 Kb:

100 e 1000 erros de RNA

1 a 10 erros se for RNA

100 e 1000 erros se DNA sem transcriptase reversa

1 a 10 erros se for DNA sem atividade Transcriptase reversa

Poliomielite causada por:

Por vezes por SV40

Vírus cuja porta de entrada é o intestino

Vírus DNA fica latente em neurónios

Polyoma vírus

Classe de Baltimore:

Genoma RNA de dupla cadeia (classe III), porque viroides têm genoma com auto emparelhamento

Em nenhum porque viroides não têm informação.

Genoma RNA negativo (Classe V), porque viroides não são traduzidos em proteínas após entrarem na célula

Genoma RNA transcritos em DNA (classe VI), porque virioides se integram no genoma hospedeira.

Vírus RNA com atividade mensageira são:

Mais comuns em plantas que em vertebrados

Genoma < 5 Kb

Mais comuns em vertebrados que em plantas

Não tem envelope

Vírus DNA simples

Replicam-se no citoplasma

Vírus que dependem de infeção conjunta com adenovírus

Não têm envelope

Genomas > 8,5 Kb

Cápside icosaédrica:

Formada por icosaedro

Todos vértices no mesmo plano

Pelo menos 1 eixo de simetria 5x

Todas faces triangulares

Cápside icosaédrica do vírus com genoma simples:

Encapsidem genoma após montagem

Requerem energia para encapsidar.

Montados sobre genoma já enovelado

Necessitam proteína Scafold para montagem

Mecanismos especializados para uma dada sequência de RNA

Silenciamento pós-transcripcional (RNAi)

Supressão silenciamento

Apoptose

Degradação RNA pelo interferão

Métodos de diagnóstico viral real time PC, TH importante para especificidade:

Deteção dos produtos amplificados de fluorocromo de intercalação

Deteção de produtos amplificados basear em sondas de Taqman

Deteção de fluorescência efetuada T desnaturação.

Fluorescência começa a diminuir após alguns ciclos

Budding:

Anti-recetores virais geralmente exportados da membrana da célula antes da saída partícula viral

Ocorrência prévia da lise celular

Anti-recetores virais expostos superiormente à célula não são detetados pelos anticorpos estão bloqueados pelos recetores

Local de saída das partículas virais não contêm anti-recetores

Vírus de classe IV não têm extremidade 5’ cap:

Ribossomas montados na região da estrutura secundária existe próximo da extremidade 5’

Primeiro... transcrição, extremidade 3’ do genoma

Ribossomas iniciam tradução na região intergénica

Ribossomas iniciam tradução pela cauda poli A

Vírus transcritos sub-genómica, regulam principalmente proteínas necessárias à replicação de outras proteínas:

Supressão cadeia stop

Supressão cadeia iniciação

Slipicing alternativo

Clivagem poliproteína

Vírus recorrem à transcrição sub-genómica codificado na extremidade 5’ do genoma:

Sinais de poli-adenilação

Proteínas envolvidas na transcrição do genoma

Proteínas estruturais

Proteínas envolvidas na tradução do genoma

Oncogénese viral:

Integração de oncogenes nas células do genoma viral

Infeção viral não origina descendência viável.

Infeção viral origina descendência viável

Integração determina genes virais no genoma do hospedeiro

Entre dois episódios agudos de herpes labial. P HSV-1 pode ser detetado:

Por ELISA (dirigido para as proteínas estruturais) nas mucosas da boca

Por PCR (dirigido para os genes das proteínas estruturais) nos nervos faciais

Por PCR (dirigido para os genes das proteínas estruturais) nas mucosas da boca

Por ELISA (dirigido para as proteínas estruturais) nos nervos faciais

Os vírus com genoma de DNA de pequenas dimensões (ex.SV40)

Requerem que a infeção seja produtiva para poderem transformar estavelmente a célula hospedeira

Só infetam células que já tenham entrado na fase S

Só transformam células hospedeiras quando a infeção é abortiva

São capazes de originar uma transformação celular estável apenas quando integram a totalidade do seu genoma no hospedeiro

No caso do SV40

Uma função do antigénio T (large) impedir a fase S

Uma função do antigénio T (large) é induzir a passagem à fase G

Uma função do antigénio T (large) é funcionar como DNA polimerase

Uma função do antigénio T (large) é regular o balanço entre transcrição inicial (early) e transcrição tardia

A estrutura das cápsides virais icosaédrica é geralmente estabilizada

Por ligações entre o genoma e a proteína da cápside

Por ligações fracas fortemente dependente das condições do meio

Pela existência de um envelope

Por ligações covalente. Estas, sendo fortes permitem que as partículas virais resistam em ambientes agressivos.

Na constituição de uma partícula viral pode encontrar

RNA polimerase no caso de ser um vírus de classe 4 (Baltimore) e DNA polimerase no caso de ser um vírus de classe 1 (Baltimore)

DNA polimerase no caso de ser um vírus de classe 2 (Baltimore)

DNA, RNA ou ambos, mas neste caso só tem funções genómicas

No que respeita ao tamanho dos genomas

Podem-se encontrar vírus de RNA com mais de 80Kb

Podem-se encontrar vírus de DNA com menos de 5Kb

Podem-se encontrar vírus de RNA com menos de 1,5 Kb

Podem-se encontrar vírus de DNA com mais de 5 Mb

O interferão é um mecanismo de defesa celular

Adquirido (adaptativo)

Classificado como “cell autonomous”

Classificado como “cell non-autonomous”

Não inato

Na resposta de um organismo contra uma infeção viral com que contacta pela primeira vez, a reação defensiva mais rápida envolve:

Inativação do P53

Silenciamento mediado por RNAi

Produção de anticorpos

Produção de interferão tipo 1

Relativamente ao processo de reconhecimento/entrada de viriões nas células, o péptido de fusão é um domínio:

De natureza hidrofóbica escondido no interior do antirecetor antes do reconhecimento

De natureza hidrofóbica presente à superfície do recetor

De natureza hidrofílica presente à superfície do antirecetor

De natureza hidrofílica escondido no interior do recetor antes do reconhecimento

Relativamente aos vírus que se replicam no núcleo:

O processo de entrada no núcleo dá-se por fusão do envelope nuclear com o envelope viral

Têm todos genoma de DNA

Alguns têm genoma de RNA

Há sempre uma fase em que o genoma viral é integrado no genoma do hospedeiro

A estabilidade das cápsides de natureza helicoidal:

É assegurada por ligações fracas entre proteínas e genoma

É assegurada por ligações fracas entre proteínas

É assegurada por ligações covalentes entre proteínas e genoma

É assegurada por ligações covalentes entre proteínas

O que há de comum entre a transformação celular estável mediada por SV40 e por um vírus do papiloma?

Bloqueamento de atividade de proteínas supressoras de tumor

Existência de uma infeção produtiva

Integração de genes estruturais no genoma do hospedeiro

Existência de uma infeção latente

Na infeção pelo SV40 de células do hospedeiro natural

É frequente ocorrer a transformação celular

A lise celular é causada pelo vírus

É na fase tardia que se deteta maior quantidade de antigénio T

A lise celular é causada pelas proteínas p53 e RB

Na centrifugação em gradiente de densidade, quando é atingido o equilíbrio de densidade entre a partícula viral e o meio

A partícula aumenta a velocidade de descida.

A partícula volta a subir devido a sofrer maior impulsão hidrostática do que nas camadas superiores

A partícula para a descida e mantem a profundidade

a partícula passa a deslocar-se a velocidade constante até sedimentar no fundo do tubo.

Synsicium é um efeito citopático que consiste

Na lise das células infetadas

Na multiplicação das células infetadas

Na fusão das células infetadas

Na apoptose das células infetadas

Considere uma preparação de um dado vírus com o título 1024 (preparação A) e outra (preparação B) do mesmo vírus com o título com o 256. Ambos os títulos foram obtidos num ensaio de hemaglutinação. Se em seguida fizer um ensaio de hemadsorção, é de esperar:

Não se pode prever o resultado

Que os valores dos títulos de A e B sejam semelhantes

Que A apresente um título superior a B no ensaio de hemadsorção

Que B apresente um título superior a A no ensaio de hemadsorção

O passo inicial do método ELISA numa modalidade concebida para detetar anticorpos contra um vírus é:

Nenhuma das opções anteriores está correta

Revestimento dos alvéolos com anticorpos específicos para o vírus

Revestimento dos alvéolos com uma molécula proteica de bloqueamento de adsorção

Revestimento dos alvéolos com a proteína da cápside (ou envelope) do vírus

No silenciamento de RNA a enzima DICER

É responsável pela inativação dos RNA mensageiros

É especifica quando à sequência da molécula de RNA que é cortada

É responsável pelo corte das moléculas de RNA de cadeia dupla em siRNAs

Suprime o silenciamento

A maioria dos vírus de RNA que infeta vertebrados

Codifica proteínas que suprimem o silenciamento de RNA

Desencadeia processos de silenciamento que, contudo, não são uma resposta de defesa celular

Não desencadeia processos de silenciamento pois não têm genoma de ds-RNA

Não codifica proteínas supressoras de silenciamento

Relativamente ao interferão do tipo I e o silenciamento de RNA

O interferão não é específico, mas o RNAi é específico contra o genoma que o desencadeia

Ambos são respostas defensivas especificas para o genoma que as desencadeia

Ambos são respostas defensivas não especificas para o genoma que as desencadeia

O interferão é específico, mas o RNAi não

A apoptose é

Um mecanismo de defesa não autónomo

Um mecanismo contra o qual os vírus não desenvolvem estratégias de contra-ataque

Um mecanismo de defesa adaptativo

Um mecanismo de defesa autónomo

No caso de vírus que fundem o envelope com a membrana do endossoma

A exposição do domínio hidrofóbico do antirecetor não é dependente do abaixamento do pH do meio

A fusão é independente da exposição do domínio hidrofóbico

Nenhuma das anteriores está certa

A exposição do domínio hidrofóbico do antirecetor é dependente do abaixamento do pH do meio

No processo de saída por “budding”

É necessário que a célula se mantenha viva até ocorrer a saída

A exportação de proteínas virais para a membrana celular é bloqueada

Ocorre a lise celular antes da saída

Há uma desorganização total do sistema de membranas celulares antecedendo a saída

O processo de estabelecimento de infeção pelo vírus do papiloma envolve:

Infeção de células das camadas superficiais da pele

Infeção de células em processo avançado de queratinização

Nenhuma das anteriores está correta.

Infeção das células das camadas profundas da pele

A cápside de natureza helicoidal:

É assegurada por ligações fracas entre proteínas e genoma

Forma-se por ligações covalentes entre proteínas e genoma

Tem origem numa procapside que se forma na célula que é preenchida pelo genoma viral

É assegurada por ligações fracas entre proteínas

Na quantificação de partículas virais podemos considerar o seguinte:

Que o ovo embrionário é o hospedeiro indicado para análises de influenza vírus

Que o ovo embrionário é o hospedeiro indicado para a análise de herpes vírus

Que o processo de hemadsorção usando células de macaco é o indicado para a análise de herpes vírus por serem células alvo deste vírus (SV40)

Que a quantificação por microscopia eletrónica é a mais correta na determinação do número de partículas infecciosas

A cápside viral icosaédrica

Está geralmente coberta por glicoproteínas à sua superfície Tem ligações entre o genoma e a proteína da cápside (helicoidal)

Um vírus com este tipo de cobertura (apenas a cápside) pode entrar na célula hospedeira por fusão com membrana plasmática

Apresenta ligações covalentes entre capsómeros porque, sendo ligações fortes, permitem que as partículas virais resistam em ambientes agressivos.

As cápsides icosaédricas de vírus com grandes genomas são:

Icosaedros cujas faces estão subdivididas em faces mais pequenas

Pequenas proteínas estruturais associadas a lípidos

Pequenas proteínas estruturais com características hidrofóbicas

Constituídos por proteínas estruturais de grandes dimensões

Numa célula que tenha recebido o interferão tipo 1 e que tenha expressado PKR e 2,5’ oligo A sintase,o bloqueamento da expressão é desencadeado por: (induzir: RNA cadeia dupla)

MHC (major jistocompatibility complex)

Proteínas virais

DNA de cadeia dupla

RNA de cadeia dupla

A maior parte dos genomas de RNA tem dimensões:

Entre 10kb e 30kb

Inferior a 3kb

Entre 3kb e 10kb

Maior que 30kb

No caso de vírus que fundem o envelope com a membrana celular:

A exposição do domínio hidrofóbico do antirecetor não é dependente do abaixamento do pH do meio

A exposição do domínio hidrofóbico do antirecetor é dependente do abaixamento do pH do meio (fusão no endossoma)

A fusão é independente da exposição do domínio hidrofóbico

Nenhuma das anteriores está correta

Os viroides:

São moléculas de DNA com elevado grau de auto-emparelhamento

São moléculas de RNA circular encapsidadas na cápsula do vírus helper (são não encapsidados)

São moléculas de RNA com elevado grau de auto-emparelhamento

Necessitam de um vírus helper para se replicarem (satélite)

A curva de crescimento de uma população de vírus numa cultura de células infetadas é na fase inicial de crescimento:

Uma curva em escada

Uma curva decrescente

Uma curva exponencial (bactérias)

Uma curva crescente em linha reta

Em microscopia (ótica, eletrónica..) o poder de resolução é tanto maior quanto maior:

A frequência da radiação

O tamanho do especimen a observar

O tamanho das partículas que constituem a radiação

O comprimento de onda da radiação

Vírus que infetam vertebrados e que têm genoma de RNA, as classes de Baltimore que estão representadas com maior número de famílias são:

Classe 3

Classe 4 ou classe 5

Classe 6

Nenhuma das anteriores está correta

Entre as várias teorias que pretendem explicar a origem de vírus e viroides:

A mais provável é que estes organismos sejam entidades independentes que evoluíram paralelamente aos organismos celulares a partir de moléculas pré-bióticas autorreplicantes (dependentes)

A mais provável é a de que estes organismos sejam formas de vida degeneradas que tenham evoluído regressivamente a partir de células

O mais provável é estes organismos terem origem extraterrestre

Não existe uma teoria única que possa explicar a origem destes organismos

Os vírus são organismo muito diversos. O número de espécies virais descritas é:

Nenhuma das anteriores está correta

Menor que o número de famílias descritas

Maior que o número de espécies de insetos que estão descritas

Surpreendentemente pequeno

Nos genomas de RNA a recombinação dá-se, através de mecanismos que envolvem:

Corte e ligação de fragmentos (DNA)

A tradução do RNA em proteína

A transcrição do RNA em RNA ou DNA

A ocorrência de elevado número de erros consecutivos da enzima que transcreve o RNA

91. Numa célula infetada, o período de eclipse corresponde ao período que medeia entre a entrada do vírus na célula hospedeira e:

A lise celular

A produção das primeiras partículas virais dentro da célula Os primeiros sinais de replicação do genoma viral

A libertação de partículas virais infeciosas para o exterior da célula

O vírus do papiloma:

Pode ficar integrado no genoma da célula hospedeira, mas essa situação só ocorre nos casos de infeções ligeiras, não associadas a tumores (graves)

Pode estar presente no citoplasma da célula hospedeira como um epissoma

Pode estar presente no núcleo da célula hospedeira como um epissoma

Está associado à formação de tumores quando todo o genoma viral fica integrado na célula hospedeira (não é todo o genoma)

As cápsides virais de um vírus sem envelope:

Formam-se sempre no citoplasma da célula hospedeira (capside- nucleo, proteinas estruturais-citoplasma)

São sempre revestidas por glicoproteínas

São estruturas muito estáveis e resistentes

Desagregam-se assim que o vírus entra na célula hospedeira

Na quantificação de proteínas virais, podemos considerar o seguinte:

Que a quantificação por microscopia eletrónica é a mais correta na determinação do no de partículas que são infeciosas

Que o “vírus do mosaico do tabaco” pode ser avaliada pelo uso de ovos embrionados

Que para se quantificar o vírus SV40, tem de se proceder à técnica RT-PCR (transcritase reversa-PCR)

Que os ensaios de placas (plaque assay) são os mais corretos na determinação do no de partículas infeciosas

O que há de comum entre o SV40 e o vírus do papiloma?

São ambos vírus em ssDNA (DNA de cadeia simples)

Ambos induzem uma infeção produtiva (formação de partículas virais) na célula permissiva que infetam

Em ambos ocorre integração de todo o genoma na célula hospedeira

Ambos têm o ser humano como único hospedeiro

A vantagem do real-time PCR por comparação ao PCR, na deteção de vírus em RNA, é a seguinte:

No real-time PCR a amplificação do gene é detetada por um software, em tempo real

No PCR a amplificação do gene é detetada por um software, em tempo real

No real-time PCR a amplificação do gene é detetada com recurso à eletroforese e gel de agarose

No PCR a amplificação do gene é detetada com recurso ao SYBR Green

A reação de real-time PCR é uma reação de amplificação em que:

O SYBR Green é amplificado em conjunto com a molécula de DNA

O SYBR Green é uma molécula que fica adicionada à extremidade da molécula de DNA amplificada

O SYBR Green é uma molécula que se intercala na molécula de DNA amplificada

O SYBR Green é usado em conjunto com a sonda TaqMan

Nos genomas virais de RNA a recombinação dá-se através de mecanismos que envolvem:

A DNA polimerase

O mecanismo de copy.choice

A reação de transcrição do RNA em DNA

A reação de tradução do RNA em proteína

No processo de imunocaptura / RT-PCR

É uma técnica que faz uso da sonada TaqMan

Primeiro realiza-se o PCR e de seguida a imunocaptura

É um técnica que faz uso da transcritase reversa,por isso está direcionada para detetar genomas em DNA

A imunocaptura e o PCR são realizados num mesmo tubo

Sobre as técnicas de deteção viral que aplicou nas aulas práticas

a técnica ELISA-DAS faz uso de dois anticorpos de captura

o Teste ELISA é mais sensível que a amplificação por RT-PCR

A técnica do RT-PCR amplifica todo o genoma viral

O anticorpo conjugado com a fosfatase alcalina ligou-se diretamente ao antigenio

A latência do herpes ocorre:

Neurónios sensoriais

À volta da boca

Faringe

SNC

Syncitium tem efeito citopático:

Componente celular ocorresincronização montagem cápside replicação genoma

Componente celular ocorre acumulação partículas virais antes da lise

.Lise celular resultante da fusão das células adjacentes

Lise celular

Os herpes vírus,

Estabelecem sempre uma fase de latência no hospedeiro

São frequentemente eliminados na totalidadedo organismo hospedeiro

Estabelecem infeções produtivas nos nervos faciais

No cado de serem neurotrópicos estabelecem infeções latentes nas mucosas da boca.

O genoma dos herpes vírus é, no que respeita à classificação de Baltimore:

Classe 7

Classe 3

Classe 2

Classe 1

Os herpes vírus codificam:

A maior parte das proteínas necessárias à replicação do genoma

Apenas um reduzido número de proteínas necessárias à replicação do genoma

Cerca de 1200 genes essenciais e auxiliares

Um elevado número de intrões

Qual das seguintes características

Poder ser utilizado para infetar células do sistema nervoso central

Persiste durante longos períodos na célula alvo, como epissoma

Poder acomodar cassetes de expressão bastante maiores em comparação com vetoresbaseados em parvo e retrovírus

Persiste durante longos períodos na célula alvo, integrando-se no genoma do hospedeiro

Os adenovírus

Têm envelope

Replicam-se no citoplasma

Só se replicam em células que estejam em fase S

Algumas das proteínas codificadas pelos adenovírus interagem com proteínas supressoras detumores [P53 e Rb]. Essas proteínas (dos adenovírus), estão codificadas no gene:

Os VA RNAs são transcritos em elevado número no inícioda infeção pelos adenovírus. A sua função é:

Bloquear a ação dos ribossomas por interferirem com o lef2

Servir de núcleo de condensação para as proteínas da cápside

Preparar a lise celular

Bloquear a ação do interferão e do silenciamento pós-transcricional

Os vetores virais baseados em adenovírus,

.Permitem a expressão do transgene durante um período de meses

Têm uma capacidade da carga (tamanho do transgene) muito pequena

Permitem a expressão do transgene durante um período de dias a semanas

Originam a lise das células alvo após a expressãodo transgene

Num vetor adenoviral de 3a geração

O DNA de enchimento é utilizado para prevenir recombinação com genes das célula fábrica

O tamanho do DNA de enchimento (stuffer DNA) corresponde a cerca de 200% do genomawild-type (75-105%)

O genoma é apenas composto pelos ITR, sinal de empacotamento, gene E1 e gene de interesse

A capacidade de replicação nas células alvo é muito superior à dos de 1o geração

Um dos efeitos secundários de terapia génica usando um vetor baseado em adenovírus é:

Infeção viral das vias respiratórias

Transmissão de SV40

Ativação do sistema imunitário do hospedeiro

Ativação de oncogenes celulares por efeito de integração do gene de interesse próximo de um oncogene celular

Nidovirales, é a designação de um agrupamento taxonómico ao nível de:

Classe

Divisão

Familia

Ordem

O agrupamento mais abrangente que existe na taxonomia viral é:

Divisão

Familia

Genero

Ordem

De entre os virus das classes III, IV, V e VI

o virus da classe VI são um alvo fácil do silenciamento mediado por RNA por exporem o dsRNA no citoplasma b) o virus da classe III são um alvo fácil do silenciamento mediado por RNA por exporem o dsRNA no citoplasma c) os virus da classe V são os únicos que ativam o silenciamento mediado por RNA d) nenhuma das classes de virus é substancialmente afetado pelo silenciamente mediado por RNA RESPOSTA ABERTA 1. Num ensaio de contagem de placas de lise, contou-se uma média de 220 placas na diluição 10-6. O volume usado no plaqueamento foi 0.5 ml. Qual é o título da preparação em pfu/ml? (indique os cálculos) 220*2*10^6 2. Em termos histórias, em que altura começou a vacinação? A varíola (endémica da China em 100ac) levou ao desenvolvimento da variolização. Em 1796 Edward Jenner, na Europa (Inglaterra), utilizou material retirado de pústulas de varíola bovina para inocular um rapaz. Nascendo a vacinação (“vacca”), mesmo antes de se conhecer o conceito de vírus. 3)Qual o título viral de uma cultura em que foram contabilizadas 15 placas fágicas após espalhamento de 0,1mL da diluição 10 -6 na caixa de petri? E se tivesse espalhado 0,5mL, qual seria o título viral? 0,1mL ---- 15pfu 0,5mL ---- 15pfu 1mL ------- x 1mL ----- y x = 150pfu/mL 150x10 6=1,5x10 8pfu/mL y = 30pfu/mL 30x10 6=3x10 7pfu 4)Refira dois aspetos que obrigam a que a transcrição do genoma infecioso ocorra no núcleo. Splicing e roubar os CAPs 5)Vários vírus tem a possibilidade de ultrapassar codões STOP durante a tradução. De um modo geral, com que objetivo. Para conseguir obter proteínas que não são necessárias em quantidade elevada

os virus da classe V são os únicos que ativam o silenciamento mediado por RNA

o virus da classe III são um alvo fácil do silenciamento mediado por RNA por exporem o dsRNA no citoplasma

nenhuma das classes de virus é substancialmente afetado pelo silenciamente mediado por RNA

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