Teste 2 - cromatografia (HPLC)
HPLC; vantagens; desvantagens; o que não fazer!
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De acordo com seus estudos, responda qual definição se adequa a HPLC.
É uma técnica cromatográfica que utiliza como FM (fase móvel) um
líquido e equipamentos sofisticados para separar os
componentes de uma amostra pela interação com a FE (fase estacionaria) e
com a FM.
Utiliza-se colunas metálicas e FM pressurizada, obtida
com auxílio de bombas de baixa pressão, para permitir uma
vazão mais rápida da FM.
É uma técnica cromatográfica que utiliza como FE (fase estácionaria) um
líquido e equipamentos sofisticados para separar os
componentes de uma amostra pela interação com a FE (fase estacionaria) e
com a FM.
É também conhecida como HPLC, ou de Alta Velocidade,
ou de baixa Pressão ou de Alto Desempenho ou, ainda, de
Alta Performance.
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as vantagens de HPLC são:
Boa para análise qualitativa e FM é utilizada várias vezes.
Versatilidade: único requisito é a solubilidade da amostra na FE.
Versatilidade: único requisito é a solubilidade da amostra na FM. Além do tempo reduzido de análise.
Bons resultados quantitativos: desvios inferiores a 3%.
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As desvantagens de HPLC são:
Alto custo do equipamento. / Alto custo de manutenção do equipamento. / Experiência do operador.
Alto custo do equipamento. / Alto custo de manutenção do equipamento. / não exige experiencia do operador.
Espectrômetro de massas: ~ US$ 300.000 e Índice de refração com baixa detectabilidade, pouco estável.
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algumas aplicabilidades do HPLC; Pesticidas, Proteínas, Alimentos, Aminoácidos, Corantes e Vitaminas. essa afirmação é falsa ou verdadeira?
falsa.
verdadeira.
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sobre os solventes da fase móvel, quais características estão certas?
NÃO DEGRADAR A FASE ESTACIONÁRIA, DEVE TER ALTO GRAU DE PUREZA e ÁGUA MONO-DESTILADA E DEIONIZADA COMUM SÃO MAIS ADEQUADAS.
DEVE TER ALTO GRAU DE PUREZA. TER POLARIDADE E VISCOSIDADE DIFERENTES ENTRE SI e UTILIZAR FASES MOVEIS AGRESSIVAS.
DEVE TER ALTO GRAU DE PUREZA, DISSOLVER A AMOSTRA SEM DECOMPOR SEUS COMPONENTES e NÃO DEGRADAR A FASE ESTACIONÁRIA.
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para que serve o degaseificador?
Causa instabilidade na linha de base: bolhas no detector causam
instabilidade da linha de base;
Reprodutibilidade da vazão: retira ar dissolvido na FM e evita
bolhas na bomba;
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qual é o melhor degaseificador?
Degaseificador “on-line”
Vácuo + Ultra-Som
Purga com Hélio:
Ultra-Som:
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a quais degaseificadores essas características pertencem? I) "Muito lento, pouco eficiente, requer agitação, em geral o pior método quando usado sozinho." II) Rápido, eficiente, refazer de 12 em 12 horas."
I) Ultra-Som / II) Vácuo + Ultra-Som
I) Purga com Hélio / II) Ultra-Som.
I) Ultra-Som / II) Degaseificador “on-line”:
I) Vácuo + Ultra-Som/ II) Degaseificador “on-line”:
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sobre as bombas de alta pressão, os principais requisitos são: Ser de material inerte, Devem gerar altas pressões e permitir eluição por gradiente. esta afirmação é verdadeira?
Falsa.
Verdadeira.
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Indique a alternativa incorreta: I) eluição é o desenvolvimento da amostra no sistema cromatográfico. II) eluição Isocrática; deve ter a mesma composição de fase móvel durante a eluição. III) eluição por Gradiente: Composição da fase móvel não varia durante a eluição. IV) eluição por Gradiente: Utilizado na separação de misturas complexas com diferentes funções químicas.
Apenas a III.
Todas estão incorretas.
Apenas I e II e IV.
Apenas a III e IV.
Apenas a II e IV.
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onde fica posicionada a coluna de guarda?
junto ao detector.
entre o injetor e o detector.
antes da coluna de separação.
Localizada entre o injetor e a coluna de separação.
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a coluna de guarda serve para proteger a coluna de separação, aumentando seu tempo de vida. essa afirmação é:
verdadeira.
falsa.
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quais as três principais vantagens da Cromatografia Líquida com Fase Ligada?
não precisa de tanta estabilidade química./ Liberdade de escolha da FM, vazão e temperatura./ Elulição por gradiente.
não precisa de tanta estabilidade química./ Liberdade de escolha da FM, vazão e temperatura./ Ebulição por gradiente.
Alta estabilidade química./ Liberdade de escolha da FE, vazão e temperatura./ Ebulição por gradiente.
Alta estabilidade química./ Liberdade de escolha da FM, vazão e temperatura./ Eluição por gradiente.
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quais as três principais desvantagens de Cromatografia Líquida com Fase Ligada ?
Preparo (síntese) é trabalhoso./ Menor recobrimento da superfície / e Restrição ao pH: 2< pH < 8.
Preparo (síntese) é trabalhoso./ Menor recobrimento da superfície / e Restrição ao pH: 4< pH < 10.
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quais as três principais vantagens de HPLC – Fase Reversa?
Fases estacionarias menos tóxicas, mas de alto custo. / Boa estabilidade frente aos vários solventes. / Análises rápidas.
Fases Móveis menos tóxicas, mas de alto custo. / Boa estabilidade frente aos vários solventes. / Análises rápidas.
Fases estacionarias menos tóxicas e de menor custo. / Boa estabilidade frente aos vários solventes. / Análises rápidas.
Fases Móveis menos tóxicas e de menor custo. / Boa estabilidade frente aos vários solventes. / Análises rápidas.
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qual alternativa não é uma desvantagem da HPLC – Fase Reversa?
Problema na separação de compostos básicos.
Solventes Residuais.
Silanóis Residuais:
Intervalo de pH: 2<pH<8
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quais detectores pertencem a HPLC?
Espectrometria de Massas, DCE e Espalhamento de Luz
Índice de Refração, Espalhamento de Luz e Dicroísmo Circular.
Dicroísmo Circular, FID e Índice de Refração.
FID, Índice de Refração e DCE.
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O que não fazer em HPLC?
Usar HCl, degradado em sistema de aço inox/ Deixar a bomba trabalhar cheia/ Injetar amostras que podem precipitar na fase móvel.
perder a paciência / Deixar a bomba trabalhar seca/ não usar fita de Teflon para vedar conexões.
Usar fita de Teflon para vedar conexões: sem efeito e pode causar
entupimento. / perder a paciência / Deixar a bomba trabalhar seca.
